治疗前外周血炎性标志物对EGFR突变阳性晚期非小细胞肺癌患者的预后价值研究

  目的  探讨治疗前外周血炎性标志物在表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）阳性晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）患者中的预后作用。  方法  回顾性分析2015年1月至2018年10月中国人民解放军总医院第五医学中心142例EGFR突变阳性晚期NSCLC患者临床资料。通过受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC）确定中性粒细胞与淋巴细胞计数比值（neutrophil-to-lymphocyte ratio，NLR）、血小板与淋巴细胞计数比值（platelet-to-lymphocyte ratio，PLR）、系统免疫炎症指数（systemic immune-inflammation index，SII）和淋巴细胞与单核细胞计数比值（lymphocyte-to-monocyte ratio，LMR）的最佳临界值，应用Kaplan-Meier方法进行生存分析。Cox比例风险模型评估各变量的预测价值。  结果  NLR、PLR、SII和LMR的最佳临界值分别为2.60、167.32、687.39和3.13。根据最佳临界值分别将研究对象分为高值组和低值组，高NLR、PLR和SII组的中位无进展生存期（median progression-free survival，mPFS）及中位总生存期（median overall survival，mOS）均显著低于低值组中相应值，高LMR组mPFS及mOS较低LMR组延长。  结论  治疗前升高的NLR、PLR、SII和降低的LMR可能与接受靶向治疗的EGFR突变阳性晚期NSCLC患者的不良预后相关。      

肌萎缩侧索硬化伴认知功能障碍的研究进展

认知功能障碍在肌萎缩侧索硬化（ALS）患者中是普遍存在的，ALS伴认知功能障碍常提示预后不良。近年来对ALS患者认知功能障碍的研究取得了一定的进展，本文对ALS伴认知功能障碍的临床特点、生物标志物、遗传学特征和最新治疗进展进行综述，以期为ALS伴认知功能障碍的临床诊疗提供新思路。     

Integrating in vitro testing and physiologically-based pharmacokinetic (PBPK) modelling for chemical liver toxicity assessment—A case study of troglitazone

In vitro to in vivo extrapolation (IVIVE) for next-generation risk assessment (NGRA) of chemicals requires computational modeling and faces unique challenges. Using mitochondria-related toxicity data of troglitazone (TGZ), a prototype drug known for liver toxicity, from HepaRG, HepG2, HC-04, and primary human hepatocytes, we explored inherent uncertainties in IVIVE, including cell models, cellular response endpoints, and dose metrics. A human population physiologically-based pharmacokinetic (PBPK) model for TGZ was developed to predict in vivo doses from in vitro point-of-departure (POD) concentrations. Compared to the 200–800 mg/d dose range of TGZ where liver injury was observed clinically, the predicted POD doses for the mean and top one percentile of the PBPK population were 28–372 and 15–178 mg/d respectively based on C_max dosimetry, and 185–2552 and 83–1010 mg/d respectively based on AUC. In conclusion, although with many uncertainties, integrating in vitro assays and PBPK modeling is promising in informing liver toxicity-inducing TGZ doses.     

受控型蜕皮激素诱导表达截短型hIGF-Ⅰ转基因载体的构建及其在细胞水平上的有效性检测

目的：构建一种可以在哺乳动物细胞中蜕皮激素诱导表达截短型hIGF-Ⅰ的受控型转基因载体，为制备受控型蜕皮激素诱导表达截短型MGF-Ⅰ的转基因小鼠奠定基础。方法：利用分子克隆技术构建受控型蜕皮激素诱导表达截短型hIGF-Ⅰ的转基因载体；将其电转至AM1菌中，利用其中的Cre重组酶将载体上两个同向LoxP序更锚定的新霉素（neomycin）基因删除，解除其对蜕皮激素诱导表达系统的阻断作用，利用PCR、酶切和测序鉴定删除情况；将重组后的载体转染至COS7细胞中进行瞬间表达，蜕皮激素诱导后回收培养上清和细胞裂解物进行Western印迹分析，检测hIGF-Ⅰ的表达情况。结果和结论：成功构建大小为13．6kb的转基因载体pOE-IGF-Ⅰ；转化至AM1中后，PCR、酶切和测序的结果都证明其中的Cre酶能够将载体上neomycin基因删除；重组后的载体转染至COS7细胞中进行诱导表达，Western印迹实验证明截短型MGF-Ⅰ能够在COS7细胞中顺利表达。上述结果证明该蜕皮激素诱导表达截短型hIGF-Ⅰ的受控型转基因载体能够用于转基因小鼠的制备。     

bevacizumab治疗乳腺癌的基础和临床研究

分子靶向药物bevacizumab是针对血管内皮生长因子(VEGF)的重组人源化单克隆抗体,在多种恶性肿瘤的治疗中显示了临床效果。现就bevacizumab的作用机制及其在乳腺癌治疗中的临床研究进展作一综述。     

生肌散质控方法的研究

目的 建立生肌散的质量标准。方法 采用TLC法对处方中血竭、冰片进行鉴别，用HPLC法测定方中君药儿茶中儿茶素的含量。结果 在TLC色谱中，能检出血竭、冰片。儿茶素在0．1762～3．524μg范围内，浓度与峰面积线性关系良好（r=0．9994），样品的平均加样回收率为103．06％，RSD为0．39％（n=6）。结论 本文建立的方法对方中3味药材能准确、快速地进行定性、定量检测，可用于生肌散的质量控制。     

A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

应用地理信息系统分析中国肾综合征出血热的空间分布

目的　利用地理信息系统 (GIS)技术分析中国大陆肾综合征出血热 (HFRS)的空间区域分布 ,建立HFRS危险区域分布图。方法　收集中国 41个HFRS监测点 1 995～ 1 998年的人群发病资料建立数据库 ,以中国省级、县级、一级河流数字地图为背景 ,在ArcGIS软件的支持下 ,与建立的数据库关联并对监测点人群发病资料进行反距离权重插值分析 ;收集 1 998年 6月SPOT4卫星覆盖东南亚地区的植被影像 ,逐一提取出各监测点监测区域的归一化植被指数 (NDVI) ,与 1 995～ 1 998年HFRS监测点人群平均发病率进行相关分析 ;根据不同流行强度监测区域的NDVI值 ,对遥感影像使用不同的颜色进行密度分割。结果　HFRS监测点人群发病资料的空间分析预测模型显示 ,中国HFRS主要分布于黑龙江流域、黄河中下游地区、长江中下游地区及京杭大运河 淮河流域地区 ,与1 995～ 1 998年全国各县HFRS平均发病率分布图进行比较 ,发现两者基本一致 ;相关分析显示HFRS发病率与NDVI之间呈现正相关 (r=0 .41 7,P <0 .0 1 ) ,根据各监测点NDVI的差异建立了中国HFRS危险区域分布图。结论　根据监测点数据采用GIS技术建立的预测模型对预测全国HFRS的分布情况有重要意义     

人抗HBsAg噬菌体抗体Fab段基因的序列分析及表达

对已建的噬菌体抗体库分离出来的人抗－ＨＢｓ克隆进行了序列分析和表达研究，发现４个克隆中３个克隆的重链和轻链完全相同，ＤＮＡ序列分析表明ＶＨ分别属于ＶＨ１亚群和Ⅱ亚群，其轻链ＶＬ分别属于ＶλⅡ亚群和ＶλⅠ亚群。构建了可溶性Ｆａｂ段表达载体，显示出在细菌中表达的Ｆａｂ段抗体与ＨＢｓＡｇ特异性结合，这说明所筛选出来的噬菌体抗体具有ＨＢdisplay status